Metabolic Imaging by Simultaneous FLIM of NAD(P)H and FAD

我們描述了基于同時(shí)記錄NAD（P）H和FAD的熒光壽命圖像的代謝成像系統(tǒng)。我們以人膀胱細(xì)胞為例演示了該系統(tǒng)的性能。正常組織和發(fā)炎組織與腫瘤組織清楚地區(qū)分開(kāi)，隨后由組織學(xué)結(jié)果證實(shí)。

日期：2020年8月27日，星期四，北京時(shí)間晚上8點(diǎn)

總覽

我們描述了基于同時(shí)記錄NAD（P）H和FAD的熒光壽命圖像的代謝成像系統(tǒng)。該系統(tǒng)使用bh TCSPC FLIM技術(shù)的多維記錄功能。將兩個(gè)激發(fā)波長(zhǎng)復(fù)用以交替激發(fā)NAD（P）H和FAD。一個(gè)FLIM通道在NAD（P）H的發(fā)射帶中檢測(cè)，另一個(gè)在FAD的發(fā)射帶中檢測(cè)。FLIM數(shù)據(jù)由SPCImage數(shù)據(jù)分析軟件處理。對(duì)于兩個(gè)通道，數(shù)據(jù)分析都會(huì)提供振幅加權(quán)壽命tm，組分壽命t1和t2，組分振幅a1和a2以及振幅比a1 / a2的圖像。此外，它還提供了熒光壽命氧化還原比（FLIRR），a2 nadh / a1 fad。我們以人膀胱細(xì)胞為例演示了該系統(tǒng)的性能。從膀胱中切除組織后立即從細(xì)胞中獲取FLIM。之后，通過(guò)組織學(xué)評(píng)估樣品。在tm圖像，a1和a2圖像以及FLIRR圖像中區(qū)分正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞。事實(shí)證明，最可靠的判別參數(shù)是NAD（P）H熒光的振幅a1和a2。正常組織和發(fā)炎組織與腫瘤組織清楚地區(qū)分開(kāi)，隨后由組織學(xué)結(jié)果證實(shí)。同樣，來(lái)自FAD通道的FLIM數(shù)據(jù)顯示正常組織和腫瘤組織也存在顯著差異。但是，F(xiàn)AD結(jié)果與NAD（P）H的結(jié)果不一致。因此，對(duì)FAD FLIM數(shù)據(jù)的解釋需要進(jìn)一步研究。通過(guò)組織學(xué)評(píng)估樣品。在tm圖像，a1和a2圖像以及FLIRR圖像中區(qū)分正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞。結(jié)果最可靠的判別參數(shù)是NAD（P）H熒光的振幅a1和a2。正常組織和發(fā)炎組織與腫瘤組織清楚地區(qū)分開(kāi)，隨后由組織學(xué)結(jié)果證實(shí)。同樣，來(lái)自FAD通道的FLIM數(shù)據(jù)顯示正常組織和腫瘤組織也存在顯著差異。但是，F(xiàn)AD結(jié)果不如NAD（P）H一致。因此，對(duì)FAD FLIM數(shù)據(jù)的解釋需要進(jìn)一步研究。通過(guò)組織學(xué)評(píng)估樣品。在tm圖像，a1和a2圖像以及FLIRR圖像中區(qū)分正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞。結(jié)果最可靠的判別參數(shù)是NAD（P）H熒光的振幅a1和a2。正常組織和發(fā)炎組織與腫瘤組織清楚地區(qū)分開(kāi)，隨后由組織學(xué)結(jié)果證實(shí)。同樣，來(lái)自FAD通道的FLIM數(shù)據(jù)顯示正常組織和腫瘤組織也存在顯著差異。但是，F(xiàn)AD結(jié)果與NAD（P）H的結(jié)果不一致。因此，對(duì)FAD FLIM數(shù)據(jù)的解釋需要進(jìn)一步研究。

 

關(guān)于演講者

Wolfgang Becker是時(shí)間分辨光學(xué)檢測(cè)技術(shù)的專家。他于1979年在德國(guó)柏林獲得博士學(xué)位。自1993年以來(lái)，他是柏林Becker＆Hickl GmbH的負(fù)責(zé)人。他感興趣的領(lǐng)域是高級(jí)時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)技術(shù)的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用。他于1989年開(kāi)始開(kāi)發(fā)多維TCSPC技術(shù)，并且是TCSPC FLIM技術(shù)的創(chuàng)始人，該技術(shù)現(xiàn)已廣泛用于激光掃描顯微鏡。他是bh TCSPC手冊(cè)的作者，該手冊(cè)現(xiàn)已在第8版發(fā)布，并且是“高級(jí)單光子計(jì)數(shù)技術(shù)”（Springer，2005年）的作者，也是“高級(jí)單光子計(jì)數(shù)應(yīng)用程序”（Springer，2015年）的編輯。他喜歡貓，滑雪和沙灘排球。